高效液相色谱柱的选择及怎么装柱介绍

高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时， 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出， 通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

高效液相色谱柱怎么装柱：

1. 色谱柱应该是可以直接接在匀浆罐上的，如果不能，则需要一个转换接头。这个转换接头的尺寸很重要，既要能防止漏液，又要避免过硬或尺寸不合适而导致色谱柱接口螺纹的损坏；

2. 具体装柱过程一般来说是①先以合适的匀浆液（多为有机溶剂，刘国诠老师的《色谱柱技术》一书中列的比较全，可供参考）将填料充分分散（可以借助搅拌、超声等方式）；②在填料匀浆的过程中，完成准备工作，即把色谱柱接在匀浆罐的下端（色谱柱不接匀浆罐的一段要接好筛板和柱头，确保拧紧但不能拧死以免损坏色谱柱），打开匀浆罐上端和气泵之间的接头以便灌入匀浆液；③匀浆液罐好后，接好匀浆罐上端接头，开始加压；④选择合适的压力，就可以把填料压实了；⑤稳定在适当的压力上压一定时间后，卸掉压力，卸下色谱柱，把接匀浆罐这一段的填料抹平，装上筛板和柱头即可使用。

3. 装柱是个困难的过程，需要耐心摸索压力、匀浆液体积等参数，才能确保柱床均匀密实，达到**柱效和峰形。如果装的不好，则可能出现柱效不够，或拖尾等问题。

高效液相色谱柱的选择：

看你的流动相而定。

正相和反相是根据固定相和流动相的极性差异定义的。正相是固定相极性大，反相是流动相极性大，而样品的分离情况与极性直接关联。

像氰基柱和氨基柱，都是正相反相都可以用，主要区分是根据你的流动相。如果你的流动相中是水、甲醇、乙腈这些东西，那肯定是反相的。如果是正己烷、乙醇、四氢呋喃这些东西作为流动相，那基本就是正相的。

个人建议，使用反相色谱柱，不要使用正相的流动相。

第一：你色谱柱的填料不同，跑出来的色谱峰可能*不同。检测方法不可取。

第二：反相色谱柱冲入像是四氢呋喃这类的物质，很有可能导致填料坍塌。