做好这几点，轻松解决酶联免疫试剂盒常见问题

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Clover®酶联免疫试剂盒预实验的必要性，通过预实验可以熟悉整个实验的流程，发现可能忽略的问题；可以测试样本和试剂盒是否匹配，一旦出现不匹配的情况，不至于浪费过多样本；可以对样品中目的分析物的浓度作一下大致参考，以确定合适稀释度。

　　一、Clover®酶联免疫试剂盒使用注意事项：

1. 室温低于20℃或试剂及样品未回到室温（20- 25℃）会导致数值偏低。

2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。

3. 标准物质和显色液对光敏感，避免直接暴露在光线下。

4. 混合要均匀，洗板要*（包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀）。

5. 终止液为强酸性物质，避免接触皮肤。

6. 不要使用过了有效期的试剂盒，也不要混合使用不同批次的试剂盒，这样会引起测定结果不准确。

7. 试剂盒的储存条件是2-8℃，切勿冷冻。

   　　二、剩余试剂的妥善保存：

   酶联免疫试剂盒恢复至室温后，取出要使用的酶标板孔，未使用的酶标板孔应及时放回铝箔袋，加入干燥剂，封紧封口，冷藏保存。

   试剂盒常用检测方法简介

   ELISA试剂盒一般适合样品检测量大，实验室中常用于初筛的检测方法。若检测到阳性样本，再用确认方法做准确定量。

   试剂盒检测方法及优点介绍：

   A、间接法：此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。

   优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析，不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。

   B、直接法：将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。

   优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。

   C、双抗体夹心法：被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体，另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量，或不标记，再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量，这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。