克伦特罗检测试剂盒检测原理
本试剂盒是利用竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被抗克伦特罗抗原。检测时,加入标准品或样品溶液,克伦特罗抗体及酶标记物,包被抗原和加入样本中的克伦特罗竞争性地与克伦特罗抗体结合后,再与酶标记物形成抗原抗体复合物,用TMB底物显色;加入反应终止液,在450nm波长酶标仪下进行检测,样品中的克伦特罗浓度与吸收光强度成反比。
样本处理前须知
处理任何样本时,都须注意:
实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁净实验器具,以避免污染干扰实验结果。
注意事项
室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20-25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。如不慎滴漏到皮肤上,请尽快用水冲洗。
不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
保存试剂盒于2-8℃,不要冷冻,将不用的微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
显色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450nm)值小于0.5(A450nm<0.5 )时,表示试剂可能变质。
在加入底物液后,一般显色15分钟即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20分钟(或更长),但不得超过30分钟。反之,则减短反应时间。
该试剂盒佳反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。