三聚氰胺是一种化工原料,在食品和饲料中不得人为添加,长期摄入会造成生殖、泌尿系统的损害,膀胱、肾部结石,并可进一步诱发膀胱癌。中国卫生部等5部委2011年第10号公告中规定婴儿配方食品中三聚氰胺的至高值为1mg/kg,其他食品中三聚氰胺的至高值为2.5mg/kg,高于上述至高的食品一律不得销售。
试剂盒是以抗原-抗体反应为基础。微孔板上包被有三聚氰胺包被原。加入三聚氰胺(MEL)标准品或样品、和抗体后,游离的三聚氰胺与包被原竞争结合抗体,没有结合的抗体及抗原被洗去,再加入酶标二抗,与抗体-包被原的结合物反应,再次洗板后,将未结合的酶标二抗洗去。加入TMB底物显蓝色,加入终止液后颜色由蓝变黄,用酶标仪在450nm处检测,吸光值与样品中三聚氰胺的含量成负相关,与标准曲线比较即可得出三聚氰胺的含量。
使用注意事项:
1)室温低于20℃或试剂及样品未回到室温(20- 25℃)会导致数值偏低。
2)在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。
3)标准物质和显色液对光敏感,避免直接暴露在光线下。
4)混合要均匀,洗板要干净(包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀)。
5)终止液为强酸性物质,避免接触皮肤。
6)不要使用过了有效期的试剂盒,也不要混合使用不同批次的试剂盒,这样会引起测定结果不准确。
7)试剂盒的储存条件是2-8℃,切勿冷冻。