黄曲霉毒素(aflatoxins,AFT)是一类结构和理化性质相似的真菌次级代谢物,具有强致癌性和免疫抑制性。该类毒素广泛存在于花生及其制品、玉米及其制品、乳与乳制品、动物饲料、棉花籽、杏仁、开心果等食品中,黄曲霉毒素不仅直接对人体及动物造成毒害,还可以通过食物链从动物体转内移到人体内造成二次危害。黄曲霉毒素的检测方法有多种,主要有薄层层析法、快速微柱法、酶联免疫法、电化学免疫传感器法、高效液相色谱法和液相色谱串联质谱法等。
黄曲霉毒素亲和柱分为柱压型(带玻璃试管)和推杆型(针筒式)两种,以极性、非极性及离子交换等基团组成填充剂,可选择性吸附样液中的脂类、蛋白质类等杂质,毒素不被吸附而直接通过,其操作更为简便,不需要进行活化、淋洗和洗脱操作,只需要直接上样,30秒钟即可完成整个净化过程,可同时净化多种毒素,降低检测成本,有效提高检测效率,稳定性强,回收率高,适用于食品、粮食饲料、饮料、中药材等多种复杂样品。
亲和柱利用抗原抗体特异性可逆结合的原理,将抗体与凝胶共价结合,然后填充柱子。将样品提取溶液过免疫亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,再用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原。其提纯效率很高,适用于各类复杂样品包括食品、饲料等多种基质。整个纯化过程30分钟左右。
黄曲霉毒素亲和柱使用注意事项:
(1)黄曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次氯酸钠浸泡过夜。
(2)不要使用过有效期的免疫亲和柱。
(3)免疫亲和柱应在2-8℃保存。不要冷冻。
(4)使用前,兔疫亲和柱雷至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。
(5)按以上的提取过程,样品通过柱子的实际体积等于1g原物质,分析方法的检测限可以通过改变进柱的样品体积而改变。