红曲很早就广泛作为食品防腐剂、增香剂用于各种传统食品。桔霉素是红曲食品中的一种真菌产生的次级代谢产物,具有较明显的肾毒性,剂量过大会导致动物死亡。目前,桔霉素常用的检测方法多为仪器分析方法,如高效液相色谱、液质联用和高效毛细管电泳等。普通仪器分析方法对样品纯度要求较高,均需经过一定的前处理,而传统的样品前处理技术,如液-液萃取、固相萃取、固相微萃取等,步骤繁琐,缺乏选择性,容易受其他成分的干扰,准确度低。
桔青霉素亲和柱则是一种新型的样品前处理技术。它的原理是利用抗原抗体间特异性的可逆结合来实现对复杂样品中的目标物质的净化富集处理。现已可结合常规仪器分析可广泛应用于食品安全检测领域。桔青霉素(Citrinin)是青霉属和曲霉属的某些菌株产生的真菌毒,是一种肾毒素,它能引起猪、鸡、鸭和鸟类等几乎所有动物发生肾脏病变,但急性毒性在不同的品种之间有所差异。对鸭来说,半致死剂量是57mg/kg;鸡是95mg/kg;兔子是134mg/kg。桔青霉素与曲霉毒素有协同作用,可抑制鼠科动物肾脏RNA的合成,小麦、燕麦、黑麦、大麦、玉米、稻谷等都可生长桔青霉素。
桔青霉素亲和柱的制备方法属于免疫亲和层析及生物毒素检测技术领域。是桔霉素免疫亲和柱的制备方法。采用甲醛缩合法将桔霉素与载体蛋白连接制备免疫原,免疫动物得到抗桔霉素抗体。本体聚合法制备嵌合铜离子聚合物。将聚合物吸附抗桔霉素抗体制得的免疫亲和吸附剂填充于固相萃取管中制得桔霉素免疫亲和柱。制备的免疫亲和柱能与桔霉素特异性结合,净化富集得到纯度和浓度均较高的桔霉素溶液。免疫亲和柱结合容量为597ng;样品中桔霉素添加回收率为83.7%~93.2%;重复使用3次,回收率不低于80%。可以应用于发酵食品中桔霉素的快速检测。